Preparación de inoculos en semillas y granos

La preparacion de inoculo constituye la base para la propagacion o desarrollo masivo del hongo en semillas o granos, principalmente sorgo, centeno, arroz o trigo.

Material:

Semillas de gramineas

Frascos

Mecheros o camara de flujo laminar

Alcohol 70%

Agujas de diseccion

Bisturi o navaja

Olla de presion o autoclave

La elaboracion de inoculo se realiza en dos etapas:

Inoculo primario:

Es la propagacion del micelio en semillas a partir de una cepa crecida en medio de cultivo.

Inoculo secundario:

Es la propagacion del micelio en semillas a partir del inoculo primario, es decir, es la multiplicacion del micelio para disponer de una mayor cantidad para su siembra en el substrato elegido para la produccion de hongos.

La eleccion de los granos o semillas para la produccion de inoculo se pueden usar semillas de sorgo, trigo, centeno, cebada, avena, mijo y arroz, entre otros.

La semilla previamente se limpia, lava e hidrata por inmersion en agua de 8-12 hrs.

Transcurrido el tiempo de hidratacion, los granos se enjuagan y se escurre el exceso de agua con la ayuda de un colador, pasando una tela de algodon limpia y seca sobre la semilla hasta que al momento de tomar una porcion con la mano esta no quede humeda.

El agua que absorbe la semilla es de aproximadamente 25-30 por ciento. Una vez controlado el contenido de humedad en el grano, se coloca la cantidad que creas necesaria en frascos, despues se esterilizan en olla de presion o autoclave, a 15 lb durante 50-60 min.

Preparacion de inoculo primario

El inoculo primario como se menciono anteriormente, se elabora a partir del micelio desarrollado en medio de cultivo, este se corta con

una navaja o bisturi flameado o desinfectado con alcohol, en fragmentos de aproximadamente 1 cm2 y con una aguja de diseccion se toma

uno de estos y se coloca sobre la semilla, se agita vigorosamente y se incuba de 25-28°C en obscuridad hasta que el micelio cubra totalmente la semilla; 15 a 20 dias despues, el inoculo primario estara listo y podra ser utilizado para elaborar el inoculo secundario.

Preparacion de inoculo secundario

El inoculo secundario se realiza vaciando un poco de inoculo primario a nuevos frascos con semilla esteril, se agita homogeneamente

y se incuban en las mismas condiciones mencionadas para el inoculo primario.

El inoculo secundario es el que se usa para la siembra y fructificacion de las setas. Si el inoculo no se emplea inmediatamente puede ser almacenado de preferencia en obscuridad y refrigeracion a 5°C hasta por tres meses, aunque lo recomendable es utilizarlo a la semana de estar en refrigeración.

Recomendaciones

Para evitar problemas de contaminacion por bacterias u hongos en nuestra semilla, se debe controlar el contenido de humedad del

grano, tomar en cuenta que la temperatura y el tiempo de esterilizacion sean los indicados, y cuidar la asepsia y limpieza de los utensilios

empleados en la inoculacion. Es recomendable aplicar a la semilla (antes de la esterilización) 3.5 g de carbonato de calcio (cal) por cada Kg de semilla, para disminuir la acidez y para que los granos no se peguen.

Es importante verificar que los granos no hayan sido tratados quimicamente (plaguicida y/o fungicida). El inoculo almacenado mas

tiempo del recomendado puede ser utilizado si no presenta contaminacion, pero la colonizacionn sobre el substrato sera mas lenta, retrasando la aparicion de fructificaciones y disminuyendo la producción.

Saludos

Mr Fungi