Preparación de Medios de Cultivo Solidos ( agares)

Preparacion de medios de cultivos solidos (agares)

Para el desarrollo del micelio de los hongos en el laboratorio, se emplean medios de cultivo solidos que le proporcionan al hongo los nutrimentos necesarios para su desarrollo.

Los medios de cultivo son generalmente vendidos por casas especializadas en diferentes presentaciones, o en dieteticas es posible adquirir agar y extractos.

Voy a mencionar algunos metodos sencillos de preparacion de los mas frecuentes medios de cultivo utilizados en preservacion de cepas.

Se recomienda tener lo siguiente:

Balanza granataria

Papel aluminio

Agua destilada o purificada

Olla de presion o autoclave

Matraz

Erlenmeyer

Cajas de Petri

Mecheros

Preparacion del Agar con extracto de malta

Ingredientes:

Extracto de Malta 10 g

Agar-Agar 15 g

Procedimiento:

Se pesan los ingredientes y se mezclan en el matraz con 1000 ml de agua destilada. La suspension se calienta y agita hasta que queden totalmente disueltos los ingredientes.

Preparacion del Agar con dextrosa y papa

Ingredientes:

Papa 200 g

Agar-Agar 15 g

Dextrosa o Glucosa 20 g

Levadura 2 g

Procedimiento:

Pelar y poner a hervir la papa en 500 ml de agua destilada o purificada durante 10-15 min. El extracto se filtra y se adiciona más agua hasta ajustar 1000 ml para reponer lo que se evaporó. Se agrega los otros ingredientes y se calienta a fuego lento moviendo constantemente durante 1-2 min hasta que queden totalmente disueltos.

Preparacion del Agar con extracto de trigo, paja y malta

Ingredientes:

Semillas de trigo 400 g

Extracto de malta 10 g

Paja de trigo 100 g

Agar-Agar 15 g

Dextrosa 10 g

Procedimiento:

Hervir el trigo en un litro de agua, dejando consumir el líquido hasta aproximadamente 500 ml, esto mismo se hace con la paja. Se filtran ambos extractos y se mezclan en un recipiente, se agrega los demás ingredientes y se le adiciona agua hasta ajustar un litro, esta suspensión se calienta hasta disolver todos los ingredientes.

Preparacion de las placas de agar solidificado

Una vez que cualquiera de los medios anteriores es diluido, el matraz se tapa con papel aluminio y se esteriliza a 15 lb de presión por 15 min en ollas de presión o autoclaves. En condiciones de asepsia (en cámara de flujo laminar o con ayuda de mecheros), el medio de cultivo tibio se vierte a cajas de Petri estériles de vidrio o desechables y se deja solidificar.

Espero le sea de ayuda!

Saludos

Mr Fungi

Bueno en olla común podrías correr el riesgo que no se esterilice bien, estos medios de cultivos tienen nutrientes y un elevado contenido en hidratos de carbono, ya que con reiteradas exposiciones a calor constante, esto puedo quemar los azucares, producir cambios físicos y químicos en el medio de cultivos inutilizandolo, por eso es preferible que si se va a usar un medio de cultivo, antes tener una olla a presión o adquirirlos esterilizados.

Pero si lo vas a hacer con olla común, por lo menos dos ciclos de 45 minutos cada uno.

Saludos!